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簡述一下invitrogen膠原蛋白酶的凍幹過程
瀏覽次數✘•╃:662釋出日期✘•╃:2022-05-23
  invitrogen膠原蛋白酶是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶·╃,具有很高的比活性·╃,是DNA提取的關鍵試劑▩☁◕。該酶在較廣的pH範圍(4〜12.5)內及高溫(50〜70°C)均有活性·╃,用於質粒或基因組DNA···、RNA的分離▩☁◕。在DNA提取中·╃,主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白·╃,使DNA遊離在溶液中·╃,隨後用不同方法進行抽提·╃,除去雜質·╃,收集DNA▩☁◕。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活▩☁◕。invitrogen膠原蛋白酶貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml▩☁◕。貯存於一20°C▩☁◕。invitrogen膠原蛋白酶溶液為無色透明·╃,如出現沉澱就不能再使用▩☁◕。
 
  使用凍幹機凍幹invitrogen膠原蛋白酶的凍幹過程中預凍階段內溫度下降曲線與隔板溫度下降曲線基本保持一致·╃,只是其斜率略低▩☁◕。
 
  在一次乾燥階段·╃,樣品溫度隨隔板升溫而升溫·╃,隔板溫度達到預定溫度後基本維持不變·╃,而樣品溫度波動較大·╃,10.5h後樣品溫度波動幅度逐漸縮小▩☁◕。
 
  在二次乾燥階段·╃,樣品溫度隨隔板上升斜率較一次乾燥階段有所提高·╃,隔板溫度達到預定溫度後基本維持不變·╃,而樣品溫度有小幅波動·╃,22h後樣品溫度逐漸接近隔板溫度▩☁◕。
 
  在一階段和二階段·╃,冷凝器溫度基本維持在-45℃~-40℃·╃,冷凝器在二階段乾燥階段溫度波動比一階段乾燥階段明顯減少▩☁◕。
 
  在預凍階段內·╃,凍幹倉壓力下降迅速▩☁◕。在一次乾燥階段的初始階段(4.0~7.5 h)·╃,凍幹倉壓力隨隔板升溫而提高;在中間階段(7.5~12.0h)·╃,凍幹倉壓力波動較大·╃,與樣品溫度波動有一定的一致性;在結尾階段(12.0~13.5h)·╃,凍幹倉壓力波動漸趨平靜▩☁◕。
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